The m-rna, expression of serca2 and ncx1 in the process of pharmacological cell protection in experimental acute pancreatitis induced by taurocholate / Expressão do rna-m, da serca2 e do ncx1 no processo de proteção celular farmacológica na pancreatite aguda experimental induzida por taurocolato

ABSTRACT Background: Intracellular calcium overload is known to be a precipitating factor of pancreatic cell injury in acute pancreatitis (AP). Intracellular calcium homeostasis depends of Plasmatic Membrane Calcium ATPase (PMCA), Sarcoplasmic Endothelial Reticulum Calcium ATPase 2 (SERCA 2) and the Sodium Calcium Exchanger (NCX1). The antioxidant melatonin (Mel) and Trisulfate Disaccharide (TD) that accelerates NCX1 action could reduce the cell damage determined by the AP. Aim: To evaluate m-RNA expressions of SERCA2 and NCX1 in acute pancreatitis induced by sodium taurocholate in Wistar rats pre-treated with melatonin and/or TD. Methods: Wistar rats were divided in groups: 1) without AP; 2) AP without pre-treatment; 3) AP and Melatonin; 4) AP and TD; 5) AP and Melatonin associated to TD. Pancreatic tissue samples were collected for detection of SERCA2 and NCX1 m-R NA levels by polymerase chain reaction (PCR). Results: Increased m-RNA expression of SERCA2 in the melatonin treated group, without increase of m-RNA expression of the NCX1. The TD did not affect levels of SERCA2 and NCX1 m-RNA expressions. The combined melatonin and TD treatment reduced the m-RNA expression of SERCA2. Conclusions: The effect of melatonin is restricted to increased m-RNA expression of SERCA2. Although TD does not affect gene expression, its action in accelerating calcium exchanger function can explain the slightest expression of SERCA2 m-RNA when associated with Melatonin, perhaps by a joint action of drugs with different and but possibly complementary mechanisms.

RESUMO Racional: A lesão celular da pancreatite aguda (PA) envolve sobrecarga de cálcio, regulada pela atividade da Cálcio ATPase de membrana (PMCA), Cálcio ATPase do Retículo (SERCA2) e pelo Trocador Sódio Cálcio (NCX1). A melatonina (antioxidante) e o Dissacarídeo Trissulfatado (acelerador do NCX1) poderiam reduzir a lesão celular na PA. Objetivo: Avaliar a expressão do RNAm da SERCA2 e NCX1 em modelo animal de pancreatite aguda tratados com melatonina e/ou dissacarídeo trissulfatado (DT). Método: Ratos Wistar foram divididos em grupos: 1) sem pancreatite aguda; 2) com pancreatite aguda por taurocolato; 3) PA e Melatonina; 4) PA e DT; 5) PA e Melatonina com DT. Amostras de tecido foram colhidas para detecção dos níveis de RNAm da SERCA2 e NCX1 por PCR. Resultados: Houve aumento da expressão do RNAm da SERCA2 no grupo com PA tratados com Melatonina, porém sem aumento de expressão do NCX1. O DT não afetou os níveis de SERCA2 e NCX1. O tratamento conjunto com Melatonina e DT diminuiu a expressão da SERCA2. Conclusões: O efeito da Melatonina é restrito ao aumento da expressão da SERCA2. O DT não tem ação na expressão gênica, porém sua ação na aceleração do trocador na retirada do cálcio pode explicar a menor expressão da SERCA2 quando associado à Melatonina, pela ação conjunta de drogas com mecanismos diferentes e possivelmente complementares.

Mechanisms of the beneficial effect of sevoflurane in liver ischemia/reperfusion injury

PURPOSE: To evaluate the underlying mechanisms by which sevoflurane protects the liver against ischemia/reperfusion injury evaluate the mechanism by which sevoflurane exerts this protective effect. METHODS: Twenty-six rats were subjected to partial ischemia/reperfusion injury for 1h: one group received no treatment, one group received sevoflurane, and sham group of animals received laparotomy only. Four hours after reperfusion, levels of alanine and aspartate aminotransferases, tumor necrosis factor-a, and interleukins 6 and 10 were measured. Analyses of mitochondrial oxidation and phosphorylation, malondialdehyde content, histology, and pulmonary vascular permeability were performed. RESULTS: Serum levels of alanine and aspartate aminotransferases were significantly lower in the sevoflurane group compared to untreated controls (p<0.05). The sevoflurane group also showed preservation of liver mitochondrial function compared to untreated controls (p<0.05). Sevoflurane administration did not alter increases in serum levels of tumor necrosis factor-a, and interleukins 6 and 10. Sevoflurane treatment significantly reduced the coagulative necrosis induced by ischemia/reperfusion (p<0.05). Pulmonary vascular permeability was preserved in the sevoflurane group compared to untreated controls. CONCLUSION: Sevoflurane administration protects the liver against ischemia/reperfusion injury, via preservation of mitochondrial function, and also preserves lung vascular permeability.

Do opioid receptors play a role in the pathogenesis of the inflammatory response in acute pancreatitis? / Os receptores opioides desempenham papel na patogênese da resposta inflamatória na pancreatite aguda?

PURPOSE: To investigate the effect of the opioid blocker naltrexone in the inflammatory response in acute pancreatitis (AP). METHODS: Acute pancreatitis was induced in anesthetized male Wistar rats by retrograde injection of 2.5% sodium taurocholate diluted in 0.5ml saline into the main pancreatic duct. Animals were randomized to the following experimental groups: Control Group (n=9): animals received an intraperitoneal injection of saline solution (0.5ml), 15 minutes before the induction of AP. Naltrexone Group (n=9): animals received an intraperitoneal injection of naltrexone 0.5ml (15 mg/kg), 15 minutes before induction of AP. Peritoneal levels of TNF-α and serum levels of IL-6 and amylase were determined The volume of the ascitic fluid was also evaluated. Myeloperoxidase (MPO) activities were analyzed in homogenates of pulmonary tissue. RESULTS: There were no significant differences in the ascitic fluid volume, nor in TNF-a and IL-6 levels in the naltrexone group compared to controls. Treatment with naltrexone did not affect the lung MPO activity compared to control group. CONCLUSIONS: The opioid receptors don't play an important role in the pathogenesis of the inflammatory response in acute pancreatitis. If opioids affect leukocytes inflammatory signaling, there are no major implications in the pathogenesis of acute pancreatitis.

OBJETIVO: Investigar o efeito do bloqueador opióide naltrexone na resposta inflamatória da pancreatite aguda. METODOS: Pancreatite aguda foi induzida em ratos machos Wistar, através de injeção retrógada de solução de taurocolato de sódio a 2,5% nos ductos pancreáticos. Os animais foram alocados em dois grupos: Grupo controle (n=9) animais receberam 0,5 ml de solução salina intra-peritonial 15 minutos antes da indução da pancreatite aguda e Grupo naltrexone (n=9) animais receberam naltrexone (15mg/kg de peso), em 0,5 ml de volume final por via intraperitoneal, 15 minutos antes da indução da pancreatite aguda. Foram avaliados o volume de ascite, os níveis séricos de amilase e IL-6, assim como TNF-α peritoneal e a atividade da mieloperoxidase (MPO) no tecido pulmonar. RESULTADOS: Não foram encontradas diferenças significantes nos parâmetros analisados entre o grupo que recebeu solução salina e o que recebeu naltrexone . CONCLUSÕES: Os receptores opióides não desempenham papel importante na resposta inflamatória sistêmica associada à pancreatite aguda. Se os opioides alteram a sinalização inflamatória nos leucócitos está ação não se reflete na patogênese da pancreatite aguda.

Is there a therapeutic window for pentoxifylline after the onset of acute pancreatitis? / Existe uma janela terapêutica para a pentoxifilina após o início da pancreatite aguda?

PURPOSE: To investigate the effects of pentoxifylline (PTX) in experimental acute pancreatitis (AP) starting drug administration after the induction of the disease. METHODS: One hundred male Wistar rats were submitted to taurocholate-induced AP and divided into three groups: Group Sham: sham-operated rats, Group Saline: AP plus saline solution, and Group PTX: AP plus PTX. Saline solution and PTX were administered 1 hour after induction of AP. At 3 hours after AP induction, peritoneal levels of tumor necrosis factor (TNF)-α, and serum levels of interleukin (IL)-6 and IL-10 levels were assayed by Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA). Determinations of lung myeloperoxidase activity (MPO), histological analysis of lung and pancreas, and mortality study were performed. RESULTS: PTX administration 1 hour after induction of AP caused a significant decrease in peritoneal levels of TNF-α and in serum levels of IL-6 and IL-10 when compared to the saline group. There were no differences in lung MPO activity between the two groups with AP. A decrease in mortality was observed in the PTX treatment compared to the saline group. CONCLUSIONS: Administration of PTX after the onset of AP decreased the systemic levels of proinflammatory cytokines, raising the possibility that there is an early therapeutic window for PTX after the initiation of AP.

OBJETIVO: Investigar os efeitos da pentoxifilina (PTX) na pancreatite aguda (PA) experimental administrando a droga após a indução da doença. MÉTODOS: Cem ratos machos Wistar foram submetidos à indução da PA através da infusão de taurocolato de sódio e divididos em três grupos: Grupo Sham: sham-operated ratos, Grupo Salina: AP e solução salina, e Grupo PTX: AP e PTX. Solução salina e PTX foram administradas 1 hora após a indução da PA. Três horas após indução da PA os níveis de fator de necrose tumoral (TNF)-α no líquido peritoneal e os níveis séricos de interleucina (IL)-6 e IL-10 foram analisados pelo método de Enzima Imunoensaio (ELISA). A atividade da mieloperoxidase (MPO) foi analisada no pulmão e foram realizadas análises histológicas do pulmão e pâncreas, além do estudo da mortalidade. RESULTADOS: A administração de PTX 1 hora após a indução da PA reduziu significativamente os níveis de TNF-α peritoneal e os níveis séricos de IL-6 e IL-10 quando comparado ao grupo salina. Redução na mortalidade foi observado após o tratamento com PTX comparado ao grupo salina. CONCLUSÃO: A administração de PTX após a indução da PA diminuiu os níveis sistêmicos de citocinas pró-inflamatórias, sugerindo a possibilidade de que existe uma janela terapêutica para PTX após o início do PA.

Mecanismos de ação da solução salina hipertônica na pancreatite aguda experimental / Mechanisms of action of hypertonic saline solution in experimental acute pancreatitis

A pancreatite aguda (PA) grave é um processo inflamatório do pâncreas caracterizado por alterações hemodinâmicas e resposta inflamatória sistêmica com altos níveis de mortalidade. A ativação inapropriada intrapancreática das enzimas pancreáticas desempenha papel importante no desencadeamento dos mecanismos inflamatórios responsáveis pelas manifestações locais e sistêmicas da doença. Em trabalho anterior observamos redução significativa da mortalidade após administração de solução salina hipertônica em ratos, através de redução das alterações hemodinâmicas e da resposta inflamatória sistêmica, mas os efeitos da solução salina hipertônica na ativação das enzimas pancreáticas e na própria lesão pancreática não foram estudados. O objetivo deste estudo foi avaliar se o mecanismo de ação da solução salina hipertônica, reduzindo a gravidade da pancreatite aguda em ratos, ocorre devido à redução da intensidade da lesão pancreática e/ou à redução da resposta inflamatória sistêmica e seus efeitos. Métodos: Foi utilizado um modelo experimental de pancreatite aguda grave através da injeção intraductal de taurocolato de sódio a 2,5%. Cento e quarenta e dois ratos Wistar machos foram divididos em quatro grupos: Controle (animais que não foram submetidos à indução da PA), Grupo ST (animais que não receberam tratamento após a indução da PA), Grupo SSF (animais que receberam 34ml/Kg de solução salina fisiológica de NaCl 0,9% por via endovenosa, 1 hora após a indução da PA) e grupo SSH (animais que receberam 4ml/Kg de solução salina hipertônica de NaCl 7,5% por via endovenosa, 1 hora após a indução da PA). Após 2, 12 e 24 horas da indução da PA os animais foram sacrificados e os materiais foram coletados para análise. Foram efetuadas a quantificação do volume de líquido ascítico e as determinações no líquido ascítico e no soro dos peptídeos liberados na ativação do tripsinogênio (TAP) e da atividade da amilase. No tecido pancreático foram realizadas as análises...

Severe acute pancreatitis (AP) is characterized by hemodynamic alterations and systemic inflammatory response leading to a high mortality rate. In AP the inappropriate activation of pancreatic enzymes plays an important role in pancreas autodigestion and in the inflammatory mechanisms responsible for the systemic response of the disease. In a previous study, we have demonstrated that hypertonic saline solution infusion significantly reduced mortality in experimental AP through an improvement in the hemodynamic conditions and by an antiinflammatory response, but its effects on the pancreatic lesions were not evaluated. The aim of the present study was to evaluate if the hypertonic saline solution reduces mortality in AP through a local effect attenuating the pancreatic lesion and/or by reducing the systemic inflammatory response syndrome (SIRS). Methods: An experimental model of severe AP by injection of 0.5ml of 2.5% sodium taurocholate into the pancreatic duct was utilized. A hundred and forty two male Wistar rats were divided into 4 groups: C (control, without AP), ST (no treated AP), SSF (animals received 34ml/kg of normal saline solution of NaCl 0.9% IV, 1 hour after AP), and SSH (animals received 4ml/Kg of hypertonic saline solution of NaCl 7.5% IV, 1 hour after AP). After 2, 12 and 24 hours of induction of AP volume of ascitic fluid, trypsinogen activation peptides (TAP) levels and amylase activity in ascitic fluid and serum were determined. Pancreatic lipid peroxidation (MDA), myeloperoxidase (MPO) activity, and pancreatic histology were analysed 2 and 24 hours after AP. TNF-, IL-6, and IL-10 levels in ascitic fluid, serum, and pancreatic tissue were also analyzed. Results: There were no significant differences in TAP levels and amylase activity in the ascitic fluid and serum in animals of groups ST, SSF and SSH. No differences in pancreatic MPO, MDA and histological score were observed among these three groups with AP...

S-nitroso-N-acetylcysteine ameliorates ischemia-reperfusion injury in the steatotic liver

BACKGROUND: Steatosis is currently the most common chronic liver disease and it can aggravate ischemia-reperfusion (IR) lesions. We hypothesized that S-nitroso-N-acetylcysteine (SNAC), an NO donor component, can ameliorate cell damage from IR injury. In this paper, we report the effect of SNAC on liver IR in rats with normal livers compared to those with steatotic livers. METHODS: Thirty-four rats were divided into five groups: I (n=8), IR in normal liver; II (n=8), IR in normal liver with SNAC; III (n=9), IR in steatotic liver; IV (n=9), IR in steatotic liver with SNAC; and V (n=10), SHAN. Liver steatosis was achieved by administration of a protein-free diet. A SNAC solution was infused intraperitoneally for one hour, beginning 30 min. after partial (70 percent) liver ischemia. The volume of solution infused was 1 ml/100 g body weight. The animals were sacrificed four hours after reperfusion, and the liver and lung were removed for analysis. We assessed hepatic histology, mitochondrial respiration, oxidative stress (MDA), and pulmonary myeloperoxidase. RESULTS: All groups showed significant alterations compared with the group that received SHAN. The results from the steatotic SNAC group revealed a significant improvement in liver mitochondrial respiration and oxidative stress compared to the steatotic group without SNAC. No difference in myeloperoxidase was observed. Histological analysis revealed no difference between the non-steatotic groups. However, the SNAC groups showed less intraparenchymal hemorrhage than groups without SNAC (p=0.02). CONCLUSION: This study suggests that SNAC effectively protects against IR injury in the steatotic liver but not in the normal liver.

Postconditioning ameliorates lipid peroxidation in liver ischemia-reperfusion injury in rats / Pós-condicionamento melhora a peroxidação lipídica na lesão de isquemia-reperfusão hepática em ratos

PURPOSE: Liver ischemia-reperfusion injury is a phenomenon presents in events like liver resections and transplantation. The restoration of blood flow may leads to local and systemic injury. Several techniques have been developed in order to avoid or ameliorate ischemia-reperfusion injury in clinical situations. The application of a sttuter reperfusion after the ischemic event (postconditioning) could alters the hydrodynamics and stimulates endogenous mechanisms that attenuate the reperfusion injury. The present study was designed to evaluate the potential protective effect of postconditioning in a model of ischemia-reperfusion in rats. METHODS: Hepatic anterior pedicle of median and left anterolateral segments were exposed and clamped for 1 hour. Two hours later, clamp was released in two different ways: Control Group (n=7): clamp was release straightforward; Postconditioning Group (n=7): clamp was released intermittently. Lipid peroxidation (malondialdehyde) and expression of the glutathione-s-transferase-α-3 gene were studied. RESULTS: Lipid peroxidation was significantly decreased in ischemic and non-ischemic liver by postconditioning. GST- α3 gene was overexpressed in postconditioned group, but not significantly. CONCLUSION: Postconditioning induced hepatoprotection by reducing lipid peroxidation in the ischemic and non-ischemic liver.

OBJETIVO: A lesão de isquemia-reperfusão hepática é um fenômeno presente em eventos tais como ressecções hepáticas e transplante de fígado. A restauração do fluxo sangüíneo após a isquemia gera lesões locais e sistêmicas. Várias técnicas foram desenvolvidas com o objetivo de evitar ou diminuir a lesão de isquemia-reperfusão hepática em situações clínicas. A utilização da reperfusão intermitente após o evento isquêmico (pós-condicionamento) pode alterar a hidrodinâmica e estimular mecanismos endógenos que atenuam o dano da reperfusão. O presente estudo foi realizado para avaliar o potencial efeito protetor do pós-condicionamento em um modelo de isquemia-reperfusão em ratos. MÉTODOS: O pedículo dos lobos mediano e ântero-lateral foi isolado e clampeado por 1 hora. Após 2 horas, o pedículo foi liberado de duas maneiras diferentes: Grupo Controle (n=7): clampe liberado de uma só vez; Grupo Pós-condicionamento (n=7): clampe liberado de maneira intermitente. Malondialdeído (MDA) e expressão do gene GST- α3 foram estudadas nos grupos. RESULTADOS: A peroxidação lipídica foi significativamente diminuída no fígado isquêmico e no fígado não isquêmico pelo pós-condicionamento. A expressão do gene GST- α3 aumentou, porém não significativamente, no grupo pós-condicionamento. CONCLUSÃO: O pós-condicionamento induziu hepatoproteção pela redução da peroxidação lipídica nos fígados isquêmico e não isquêmico.

Rosiglitazone-enriched diet did not protect liver ischemia-reperfusion injury in a rat model / Dieta enriquecida com rosiglitazona não protege a lesão de isquemia e reperfusão hepática em modelo experimental no rato

PURPOSE: To determine whether rosiglitazone-enriched diet offer protection in a classical model of liver ischemia-reperfusion injury in rats. METHODS: Two days before the experiment, rats were divided into 2 groups: Control Group (n=13) rats fed with standard diet; Rosi Group (n=13): rats fed with a powdered standard diet supplemented with rosiglitazone. The animals were submitted to liver ischemia-reperfusion by clamping the pedicle of median and left anterolateral lobes. After 1 hour of partial hepatic ischemia, the clamp was removed for reperfusion. After 2 or 24 hours (Control and Rosi Groups), blood was collected for enzymes and cytokines analysis. Ischemic and non-ischemic liver were collected for malondialdehyde analysis and histological assessment. Lungs were removed for tissue myeloperoxidase quantification. RESULTS: There were no statistical differences between groups for all analysed parameters. CONCLUSION: In this model, rosiglitazone-enriched diet did not protect liver against ischemia-reperfusion injury.

OBJETIVO: Determinar se a dieta enriquecida com rosiglitazona oferece proteção em um modelo clássico de lesão de isquemia e reperfusão hepática em ratos. MÉTODOS: Dois dias antes do experimento, os ratos foram divididos em 2 grupos: Grupo Controle (n=13): ratos alimentados com dieta padrão; Grupo Rosi (n=13): ratos alimentados com dieta em pó padrão enriquecida com rosiglitazona. Os animais foram submetidos à isquemia e reperfusão hepática por clampeamento do pedículo dos lobos médio e anterolateral esquerdo. Após 1 hora de isquemia, o clampe foi removido para a reperfusão. Após 2 ou 24 horas (Grupos Controle e Rosi), o sangue foi coletado para análise de enzimas e citocinas. Os fígados isquêmico e não isquêmico foram coletados para análise de malondialdeído e avaliação histológica. Pulmões foram removidos para quantificação da mieloperoxidase tecidual. RESULTADOS: Não houve diferenças estatísticas entre grupos em todos os parâmetros analisados. CONCLUSÃO: Nesse modelo, a dieta enriquecida com rosiglitazona não protegeu contra a lesão de isquemia e reperfusão hepática.

Inhibition of cyclooxygenase-2 in experimental severe acute pancreatitis

INTRODUÇÃO: O tratamento padrão para a pancreatite aguda permanece baseado em medidas de suporte. A busca por uma droga que altere a história natural da doença ainda é um desafio para muitos pesquisadores. O objetivo deste estudo é avaliar o efeito de um inibidor da COX-2 na pancreatite aguda grave experimental (PA) em ratos. MÉTODO: Os animais foram divididos em dois Grupos: Grupo 1 (n=30) - animais com PA induzida por taurocolato e tratados com parecoxib (40mg/Kg). Grupo 2 (n=30) - animais com PA induzida por taurocolato que receberam solução salina. O inibidor de COX-2 (parecoxib) foi injetado imediatamente após a indução, através da veia dorsal do pênis. Os parâmetros avaliados foram histologia, níveis séricos de amilase, IL-6 e IL-10 e taxa de mortalidade. RESULTADOS: Os níveis séricos de IL-6 e IL-10 foram menores do que no grupo controle. Os níveis séricos de amilase e a taxa de mortalidade permaneceram inalteradas. A análise histológica também não mostraram alterações, exceto pela necrose gordurosa, que foi maior nos animais controle. CONCLUSÃO: A inibição da COX-2 pode reduzir a liberação sistêmica de pelo menos duas citocinas, mas tem pouco efeito na lesão pancreática direta causada pelo taurocolato.

Atividade antimicrobiana de Bixa orellana L. (Urucum) / Antimicrobial activity from Bixa orellana L. (Urucum)

Realizou-se o estudo da atividade antimicrobiana de tinturas de bixa orellana L., conhecida popularmente como "urucum". As tinturas foram testadas pelo método de difusão em ágar e apresentaram atividade antibacteriana, mas foram inativas sobre as cepas de Cryptococcus neoformans e Candida albicans. Verificou-se, por triagem fitoquímica, a presença de saponinas, flavonóides, taninos, alcalóides e esteróides.

Protective effect of N2-mercaptopropionylglycine on rats and dogs liver during ischemia/reperfusion process

RACIONAL: O medicamento N2-mercaptopropionilglicina é um potente inibidor da síntese de radicais superóxidos e foi testado como agente preventivo de lesão metabólica e estrutural do parênquima hepático, no processo de isquemia/reperfusão. OBJETIVOS: Analisar alguns efeitos da administração do N2-mercaptopropionilglicina a animais de duas espécies submetidas a isquemia/reperfusão normotécnica do fígado. MATERIAL E MÉTODOS: Vinte e dois ratos e 22 cães foram divididos em quatro grupos: grupo I: ratos que receberam solução salina a 0,95 por cento; grupo II: ratos que receberam 100 mg/kg de N2-mercaptopropionilglicina; grupo III: cães que receberam salina a 0,9 por cento; grupo IV: cães que receberam 100 mg/kg de N2-mercaptopropionilglicina. Cada um dos grupos de animais foi, após 10 minutos da infusão tanto de salina, como de N2-mercaptopropionilglicina, submetidos a isquemia dos respectivos lobos esquerdos por um período de 25 minutos, seguida de reperfusão. RESULTADOS: Estudos bioquímicos, 24 horas após a reperfusão revelaram menor e significativa elevação das transaminases nos animais do grupo I (AST = 271 ± 182; ALT = 261 ± 161) e grupo IV (AST = 101 ± 45; ALT = 123 ± 89), quando comparados com os controles: grupo I (AST = 2144 ± 966; ALT = 1869 ± 1040) e grupo III (AST = 182 ± 76; ALT = 277 ± 219), respectivamente e todos em UI/dL. O estudo histológico demonstrou agressão significativamente menor nos animais dos grupos experimentais II e IV, quando comparados aos grupo I e grupo III, respectivamente. CONCLUSAO: Estes resultados sugerem liberação de radicais livres de oxigênio real e significativa no processo e que o N2-mercaptopropionilglicina pode ter efeito protetor apreciável no parênquima hepático, quando submetido a isquemia e posterior reperfusão.

Detection of codon 12 mutation in the K-ras oncogene in pancreatic tumors

Muitos dos oncogenes detectados em neoplasias malignas humanas pertencem a familia do gene ras. Mutacoes nos codons 12, 13 ou 61 em um dos tres genes ras; H-ras, K-ras e N-ras, convertem esses genes em oncogenes ativos. Ensaios rapidos para deteccao dessas mutacoes pontuais, tais como a reacao em cadeia de polimertizacao tem sido desenvolvidos nas ultimas decadas e usados para investigar o papel dos genes ras mutados na patogenese de tumores humanos...

The Amazonia variant of Vibrio cholerae: molecular identification and study of virulence genes

The pathogenic O1 Amazonia variant of Vibrio cholerae has been shown previously to have a cytotoxin acting on cultured Vero and Y-1 cells, and to lack important virulence factors such as the cholera toxin (Coelho et al. 1995a). This study extends the molecular analysis of the Amazonia strains, detecting the presence to the toxR gene, with a very similar sequence to that of the El Tor and classical biotypes. The outer membrane proteins are analysed, detecting a variation among the group of Amazonia strains, with three different patterns found. As a by-product of this work a polymerase chain reation fragment was sequenced, reading part of the sequence of the Lon protease of the Amazonia strains. The gene was not previously described in V. cholerae, but its sequences is present in the TIGR database specific for this species.

Efeito do antioxidante N2-mercaptopropionilglicina (N2-MPG) na pancreatite aguda experimental / N2-Mercaptopropionylglycine (N2 MPG) in experimental acute pancreatitis

O N2-Mercaptopropionilglicina (MPG) e um potente antioxidante na inibicao da producao de xantina-oxidase. O objetivo deste trabalho foi analisar se este efeito antioxidante poderia propiciar menor agressao do tecido pancreatico na Pancreatite Aguda (PA) induzida por dois processos: dose supramaxima de ceruleina e injecao de taurocolato de sodio a 2,5 por cento no ducto biliopancreatico do rato. Trinta e seis ratos machos Wistar (220-270 g) foram divididos em 2 grupos (G): GI-animais previamente tratados com antioxidante (MPG: 100 mg/kg) 10 minutos antes da inducao da PA e GII-animais sem tratamento previo. Os animais destes dois grupos foram submetidos a PA com dose supramaxima de ceruleina (2 doses de 20ug/kg) e PA com taurocolato onde vinte e seis ratos foram divididos em dois grupos (G): GIII-ratos tratados com MPG 10 minutos antes da PA e GIV-animais sem tratamento previo...

Lesäo hepatica na pancreatite aguda experimental: influencia da reduçäo da reserva enzimatica do pancreas / Evaluation of hepatic lesion of experimental acute pancreatitis: influence of pancreatic enzyme reduction

A pancreatite aguda (PA) produz alteracoes morfologicas e funcionais no figado. A administraçäo de doses baixas de ceruleina diminui o conteudo enzimatico do pancreas. O objetivo do presente estudo foi estudar o efeito da reduçäo do conteudo enzimatico do pancreas na funçäo mitocondrial hepatica. Ratos machos Wistar foram submetidos a PA atraves de injeçäo retrograda intraductal de taurocolato de sodio a 5 por cento com e sem infusäo de ceruleina (0,133 ug/Kg/h) durante tres horas : Grupo I (GI): sem reducao enzimatica do pancreas, com induçäo de PA, GRUPO II (GII): com reduçäo enzimática do pancreas, com induçäo de PA, GRUPO III (GIII): com reduçäo enzimatica do pancreas, sem induçäo de PA, GRUPO IV (GIV): sem reduçäo enzimatica do pancreas, sem induçäo de PA (Controle). Após duas horas da inducao da PA os animais foram sacrificados e os figados retirados para avaliaçäo da funçäo mitocondrial hepatica, determinada polarograficamente com eletrodo de Clark, medindo-se o consumo de oxigenio na ausência de ADP (S4-Basal) e na presença de ADP (S-3 Ativado), utilizando-se succinato de potassio como substrato. Os conteudos de tripsina, amilase e proteinas totais no liquido ascitico foram determinados. Após duas horas da induçäo da PA observamos aumento significativo no estado 4 da respiraçäo (41 por cento) e diminuiçäo do RCR e da relaçäo ADP/O nos animais do GI (PA sem ceruleina) quando comparados com os animais do GII (PA com ceruleina) (p<0,05). O conteudo de amilase (A) e tripsina (T) no liquido ascitico mostraram-se diminuidos nos animais do GII (A=80 +- 10 U/ml, T= 9,75 +- 1,25 U/ml), quando comparados com os animais do GI que nao receberam ceruleina ( A= 231 +- 24 U/ml, T = 40,32 +- 5,19 U/ml) (p<0,001). Infusäo somente de ceruleina (GIII) näo alterou a funçäo mitocondrial hepatica. Estes achados sugerem que a reduçäo do conteudo enzimatico do pancreas através de infusäo de ceruleina atenua a disfunçäo mitocondrial hepatica na PA experimental evidenciada por desacoplamento da oxigenaçäo fosforilativa

Lesäo hepatica na insuficiência renal mioglobinurica (rabdomiolise): estudo experimental em ratos / Hepatic dysfunction in myoglobinuric acute renal failure: experimental study in rats

A possivel relaçäo causal entre insuficiência renal mioglobinurica (rabdomiolise) e lesäo hepatica ainda nao esta bem definida e foi objeto deste estudo. Ratos machos (220-270 g) foram privados de agua por 24 horas e divididos em dois grupos: GI-animais experimentais em que a rabdomiolise foi induzida mediante injeçäo intramuscular de glicerol a 50 por cento na dose de 10 ml/kg. GII-animais controles que receberam injecao intramuscular de solucao salina. Vinte e quatro horas apos a injecao todos os animais foram sacrificados. No sangue colhido foram dosados AST, ALT, CK, ureia e creatinina. Os figados foram removidos para estudo histologico e para avaliacao da funcao mitocondrial, determinada polarograficamente com eletrodo de Clark, medindo-se o consumo de oxigenio na ausencia de ADP (S4-Basal) e na presenca de ADP (S3-Ativado). A razao do controle respiratorio (RCR) e relacao ADP/O foram calculadas...

Fisiopatologia da lesao pulmonar na pancreatite aguda / Physiopathology of pancreatitis lung injury

Sinais clinicos de lesao pulmonar desenvolvem-se em ate 50 a 70 por cento dos pacientes com pancreatite aguda. A despeito disto, a fisiopatologia da lesao pulmonar na pancreatite aguda nao esta totalmente compreendida ate o momento. O edema pulmonar e a principal complicacao respiratoria da pancreatite aguda. A permeabilidade aumentada das membranas endotelial pulmonar e epitelial alveolar sao as causas do edema pulmonar. Varios fatores tem sido apontados como causadores do edema pulmonar: liberacao de enzimas pancreaticas proteoliticas, radicais livres de oxigenio, fosfolipase A, acidos graxos livres, fator de necrose tumoral, fator ativador lactario, metabolitos do acido aracdonico e microembolizacao pulmonar. A compreensao da fisiopatologia da lesao pulmonar faculta ao medico uma melhor abordagem terapeutica dos pacientes com pancreatite aguda. O objetivo deste trabalho e expor as teorias que explicam a lesao pulmonar da pancreatite aguda

Efeito protetor da reduçäo do conteúdo enzimático do pâncreas na lesäo pulmonar da pancreatite aguda / Protective effect of reduction of pancreatic enzyme content on the pancreas in acute pulmonary pancreatitis

A lesao pulmonar surge em até 50-70 por cento dos pacientes com pancreatite aguda. A infusao de ceruleína em doses fisiológicas reduz o conteúdo enzimático do pâncreas com diminuiçao da taxa de mortalidade da pancreatite. Com objetivo de avaliar o efeito da reduçao do conteúdo enzimático do pâncreas sobre a lesao pulmonar da pancreatite aguda, foi induzida pancreatite em ratos Wistar através da infusao, dentro do ducto biliar, de soluçao de taurocolato de sódio a 5 por cento: grupo I, ratos com pancreatite; grupo II, ratos nos quais pancreatite foi induzida somente após reduçao do conteúdo enzimático do pâncreas, e grupo III, controle. A lesao pulmonar foi avaliada através da utilizaçao do corante azul de Evans, sendo menor no grupo II comparativamente ao I (P O,05). Especula-se que a reduçao do conteúdo enzimático do pâncreas diminui a lesao pulmonar da pancreatite aguda pela reduçao da quantidade de enzimas que atinge a circulaçao sistêmica.

Lesao pulmonar na pancreatite aguda / Lung injury in acute pancreatitis

Lesao pulmonar surge em ate 70 por cento dos pacientes com pancreatite aguda. O objetivo deste trabalho e de estudar a lesao pulmonar na pancreatite aguda experimental. Assim, pancreatite grave foi induzida em 63 ratos atraves da injecao de taurocolato de sodio a 5 por cento no ducto bilio-pancreatico. Apos 2, 4, 6, 12, 24 e 48 horas da inducao, foram realizadas as investigacoes. A lesao pulmonar foi maxima apos 12 horas de pancreatite, as enzimas pancreaticas (amilase e tripsina) no liquido ascitico estavam mais elevadas precocemente (2-4h) e os niveis sericos foram maiores no tempo de quatro horas. Conclue-se que na pancreatite aguda experimental ocorre lesao pulmonar com aumento da permeabilidade vascular pulmonar. Esta lesao e maxima no tempo de 12 h e tem relacao com os niveis das enzimas pancreaticas no liquido peritonial e no soro.

Lesäo hepática na pancreatite aguda: estudo experimental em ratos / Hepatic lesion in acute pancreatitis: experimental study in rats

O objetivo deste trabalho foi analisar a lesäo hepática desenvolvida durante a PA através do estudo da funçäo mitocondrial hepática. Para tanto, 54 ratos machos Wistar foram distribuídos em seis grupos: GI (controle n=6), GII (PA duas horas n=12), GIII (PA quatro horas n=6), GIV (PA 12 horas n=8), GV (PA 24 horas n=7) e GVI (PA 48 horas n=7). A PA foi induzida por injeçäo retrógrada de taurocolato de sódio a 5 por cento. A avaliaçäo da funçäo mitocondrial hepática foi determinada polarograficamente com eletrodo de Clark, medindo-se o consumo de O2 na ausência de ADP (S4-basal) e na presença de ADP (S3 ativado), utilizando-se succinato de potássio como sunstrato. A razäo do controle respiratório (RCR) e a relaçäo ADP/O foram calculadas. Na fase precoce da PA (duas e quatro horas), existe desacoplamento das mitocôndrias evidenciado por aumento do S4 e diminuiçäo do RCR e da relaçäo ADP/O, No período de 12 e 24 horas após a PA, o RCR apresenta valores iguais aos do controle. Conclui-se que as alteraçöes mitocondriais na PA säo bifásicas: as alteraçöes precoces säo caracterizadas por desacoplamento da oxigenaçäo fosforilativa e talvez resulte da açäo à distância de enzimas de produtos da açäo enzimática, enquanto as alteraçöes tardias säo decorrentes de lesöes estruturais e graves, resultantes de isquemia tecidual. Estudos hemodinâmicos devem ser efetuados para esclarecer estas alteraçöes